(1)腺病毒载体构建包装
简介:
腺病毒载体是目前基因治疗中应用最广泛的一种病毒载体。与其他病毒载体相比,腺病毒载体作为基因转移工具具有许多独特的优点:
①腺病毒粒子相对稳定;
②安全性较好;
③腺病毒基因组较大(36 kb);
④有较大的宿主范围;
⑤外源基因表达水平较高。
Gandalf使用的重组腺病毒系统,克隆阳性率高、包装稳定、出毒迅速、滴度高外,并且几乎可以在腺病毒容量内转入任何目的基因,具有同类产品不可比拟的优势。
图片实例:
以携带EGFP或RFP的腺病毒感染HEK293细胞,感染后36小时,荧光显微镜下可观察到高效的报告基因表达。
(2)慢病毒载体的构建与包装
慢病毒属于逆转录病毒的一种。慢病毒感染细胞后将外源基因整合到细胞基因组,从而实现基因的持续表达。慢病毒表达体系由于整合率高、感染谱广、表达稳定,尤其适合用于稳定细胞系构建。
pLV-EGFP-C的载体图谱:
辅助载体图谱:
成功案例:
我们已经成功用携带GFP、RFP等多种报告基因及目的基因的病毒成功感染了多种贴壁和悬浮的哺乳动物细胞。
U87细胞 Hela细胞